Метод на дискотека
На повърхността на гъстата хранителна среда, твърда трева с доверена култура, налага не повече от 6 диска, импрегнирани с антибиотици, на разстояние най-малко 2 cm един от друг. Регистрацията на резултатите се извършва след 18-24 часа инкубация в термостата за диаметъра на липсата на растеж около дисковете с антибиотици. Наличието на растеж около диска показва нечувствителността на този микроб на антибиотика. Специални таблици се използват за интерпретиране на резултатите.
Фигура 1. Дефиниция на чувствителността
мИКРООРГАНИЗМА Метод на дифузия:
1 - Микроорганизъм чувствителни до антибиотик;
2 - Микроорганизъм умерено устойчиви до антибиотик;
3 - Микроорганизъм устойчивдо антибиотик.
Метод за електронно изпитване
Принцип на метода. Определянето на чувствителността на микроорганизма се извършва подобно на тестване на метода на дискотека. Разликата е, че вместо диск с антибиотик се използва е-тест лента, съдържаща градиент на концентрации на антибиотици от максимум до минимален. При пресичането на елипс зоната на потискане на растежа с лента от е-тест, стойността на минималната огромна концентрация (IPC) се получава.
Фигура 2. Определяне на чувствителността на микроорганизмите, използващи е-тестове
Метод на серийни разреждания в бульонната среда
В тръбите, съдържащи 1 ml muler-Hinton бульон, приготвят серийни двойни разреждания на антибактериалното лекарство, например 100 ug / ml - 1-ва, 50 ug / ml - 2ND, 25 ug / ml - 3-ти, 12.5 μg / ml - 4-то място и др. След това 0,1 ml от тестовата бактериална суспензия се довежда до всяка епруветка. В същото време те поставят контрол върху растежа (1 ml бульон с Muller-Hinton и 0.1 ml бактериални суспензия). Светите се инкубират при 37 ° С за 18-24 часа, след което резултатите маркират. Липсата на замъгляване на средата показва забавяне на растежа на бактериите в присъствието на тази концентрация на лекарството.
Фигура 3. Определяне на стойността на метода на IPC на развъждане в течна хранителна среда
Минималната огромна концентрация (МЛК) е най-малката концентрация на антибиотика (в μg / ml или mg / l), която in vitro напълно потиска видимия растеж на бактериите.
2 Определяне на чувствителността на различни печати Staphylococci към антибиотици със стандартни дискове
|
Антибиотик |
Зона за потискане на растежа, mm |
Характеристика Stalma. |
Изследваната култура е чувствителна към __________________________________________________
умерено устойчив на _________________________________________________________________
устойчив за _________________________________________________.
3 Определяне на минималната преобладаваща концентрация (IPC) на пеницилин чрез серийни разреждания.
Изход: MPK пеницилин за изучавания щам възлиза на _____________________________________
Предимствата на метода: ________________________________________________________________________
Недостатъци на метода: ________________________________________________________________________
4 Откриване и регистрация на антагонистично действие на различни видове бактерии.
Микробронистки микробонист и перпендикулярно на тестните щамове са пришити към диаметъра. Счетоводните резултати се извършват в един ден след сеитба. Наличието и степента на антагонистично действие се определя от величината на теста на растежа на тестовия култури.
Бери сеитба ________________________
Изход:най-големият антагонистичен ефект е идентифициран за тестовите щамове (посочете видове) _____________________________________________________________
Урок номер 8.
Тема: Краен урок по темата: "Историческите етапи на развитието на микробиологията, морфологията, физиологията и генетиката на микроорганизмите".
Форми и размери на истинските бактерии. Характеристики на с форма на топка, прилепнали и кондолни форми на истински бактерии.
Структура на бактериите. Основните разлики между прокариотната клетка от еукариоти.
Клетъчна стена на грам-положителни и грам-отрицателни бактерии.
Видове микроскопични лекарства. Подготовка на техниката на фиксирани лекарства.
Микроскопична техника в светлинния микроскоп. Изучаването на морфологията на микроорганизмите в електронния микроскоп.
Тикниториални свойства на микробите. Багрила. Прости начини за боядисване на фиксирани лекарства.
Принципи на класифициране на патогенни прокариоти (Berges, 2001).
Защитни устройства в микроорганизми. Спорове, етапи и условия за оформяне на спора, биологично значение.
Бактериални капсули, тяхното значение.
Флагелас, тяхната структура. Cilia. Сексът.
Методи за сложни рисунки. Техника за оцветяване в грам, Cylla Nelssen, Rururi Gins, NASSESER.
Методи за изследване на микроорганизми в състояние на живот. Свържете. Принцип на метода.
Спирошет. Систематична позиция и морфология Spirochet. Характеристики на ултраструктурата и химическия състав. Изследователски методи.
Актиномицети, морфология, ултраструктура, химичен състав. Патогенни видове. Ролята на актиномицетите в природата и медицината. Методи за откриване.
Таксономия Хламидия. Морфология, структура, начини за идентифициране. Цикъл на развитие на хламидия.
Ricketcies, морфология, ултраструктура, химически състав. Патогенни видове.
Mycoplasma. Класификация. Филогенеза. Начини за идентифициране.
Дефектни форми на микроби: протопласти, спори, L-форми.
Моторни бактерии. Хранителни вещества - въглеродни и азотни източници. Класификация на бактериите чрез аутрофите на хранителни продукти и хеморготрофни
Растежни фактори и техните източници. Източници на минерални елементи.
Методи и механизми за прехвърляне на хранителни вещества през мембраната.
Енергийни нужди на бактериите. Начини за получаване на енергия от автотрофов (фотосинтеза, хемосинтеза). Източници и начини за производство на енергия в хеморготрофовете.
Аеробни и анаеробни видове биологично окисление в бактерии. Аеробни, анаеробни, по избор анаеробни и микроереофилни бактерии. Начини за създаване на анаеробни условия.
Задачи, етапи, предимства и недостатъци на бактериологичния (културен) изследвания метод.
Растеж и възпроизвеждане на микроорганизми. Методи за размножаване. Двоично (просто) разделение, механизъм. Възпроизвеждане на бактериални популации.
Принципи и методи за отглеждане на бактерии. Хранителни нужди на микробите.
Хранителни среди за отглеждане на бактерии. Изисквания за хранителни среди. Класификация на хранителни среди.
Условия и техники за отглеждане на бактерии. Техника на сеитба за хранителни среди. Моделите и естеството на растежа на бактериите върху гъста и течна хранителна среда.
Методи за освобождаване на чисти култури на аеробни и анаеробни бактерии.
Свойства на микроорганизми, използвани за идентифициране на избрани култури.
Бактерии ензими, класификация. Методи за изучаване на биохимичните свойства на микроорганизмите. Практическо използване на биохимичната активност в идентификацията на бактериите
Определяне на захарлитични свойства, състава на средата на ГИС; Определяне на протеолитични свойства, определяне на каталаза и оксидазната активност.
Принципът на експлоатация и характеристики на използването на устройства за автоматична идентификация на бактериални култури (хемокултиватор, автоматичен анализатор).
Характеристики на отглеждането на рикетци и хламидия.
Бактериофаги (фаги). Откриване на историята. Морфология, структурни особености, химически състав и свойства на фаги.
Вишка. Фази на взаимодействие с бактериална клетка. Резултатите от взаимодействието на фаги и клетки. Умерени фаги. Профаг. Феномен на лизинга. Конверсия на Fagovoy.
Методи за изолиране и титриране на бактериофаги на гъста и течна хранителна среда. Смяна на фагите в микробиологията и медицината. Фагодиагностика и фадотипове.
Наследственост. Организиране на генетичния апарат в бактерии (нуклеиди, плазмиди, Е.- субсидии, транспозони).
Принципи на функциониране на бактериалния геном. Оперо организация. Генотип и фенотип.
Плазмиди, класификация, структура и свойства на плазмид. R-плазмид, характеристики на структурата и функцията. Плазмиди бактериосинегинг.
Променливостта на микробите. Модификации в бактерии, стойност, основни прояви и свойства (несравнима, адаптивност, висока честота на директни и обратни промени, много индуциращи фактори).
Генотипна вариабилност. Мутации и тяхната класификация. Мутагена. Фенотипни прояви на мутации. Съдба мутанти. Дисоциация в бактерии. Ефект на подбора. Система за репарации на геномни щети.
Променливост на реконструкция. Механизми за образуване на комбинирани геноми. Честотата на промените в индивидуалните знаци. Трансформация, трансдукция, конюгация.
Практическото значение на знанието за генетиката на микробите. Принципи на генетичното картографиране.
Методи за генетичен анализ (молекулна хибридизация, полимеразна верижна реакция, промиване, секвениране).
Концепцията за генното инженерство и използването на неговите методи в микробиологията и биотехнологията. Получаване и използване на генетично инженерни ваксини и цитокини.
Антимикробни събития. Ефекта на екологичните фактори върху микробите. Ефектът на физическите фактори (температура, сушене, радиация, ултразвук, осмотично налягане). Ефекта на химическите фактори.
Целите, методите, средствата и обектите стерилизация и дезинфекция в медицинска и микробиологична практика. Дезинфекция на контрол на качеството. Контрол на стерилизацията и стерилност. Методи за провеждане.
Антисептици. Определение. Антисептични, изисквания, произход, свойства, групи, механизми на действие върху микробите. Видове антисептици. Терапевтичен антисептик. Превантивен антисептик.
Химиотерапевтични лекарства. Имоти. Основни групи химиотерапия. Механизми за действие върху бактериите. Концепцията за селективност и "цели" действие.
Антибиотици. Определение. Продукти от антибиотици. Синтетични и полусинтетични антибиотици.
Основните групи антибиотици в химическата структура. Бета-лактам антибиотици тетрациклини. Аминогликозиди. Макролиди и азолиди. Ansamicine (рифампицини). Левомицетин. Флуорохинолонови антибиотици. Линкомицин. Полимиксини. Гликопептиди.
Класификация на антибиотиците за механизма на действие върху бактериалната клетка.
Механизми за стабилност на микроорганизмите към антибактериални лекарства.
Методи за определяне на чувствителността на бактериите към антибиотици и други химиотерапевтични лекарства. Техника на производство, счетоводство и оценка на чувствителността по метода на дисковете, е-тест, серийни разреждания.
Урок9
Тема: Екологични бактерии. ИНФЕКЦИЯ. Патогенни микроорганизми. Микробни токсини. Биологичен (експериментален) метод.
Списък на въпросите за контрол
Микрофлора на човешкото тяло . Нормална (местно) микрофлора на човека. Auutochton и allochton, intcenarious и полупрозрачна микрофлора. Образуване и развитие на нормална микрофлора. Функции на нормалната микрофлора: антиинфекциозни, метаболитни, имунобиологични, антитоксични.
Дисмобиоценоза (дисбактериоза), причини, видове, принципи на корекция.
Концепцията за инфекция. Определение, обща характеристика. Различия в инфекциозните болести от неотмушините.
Ролята на микроорганизма в инфекциозния процес. Заразителна доза. Методи за инфекция. Входни врати. Патогенност и вирулентност. Генетичен контрол на патогенността и вирулентността. Фактори, които увеличават и намаляват микробната вирулентност.
Фактори на патогенност. Методи за определяне на вирулентността, единици. Свързващи патогенни и условни патогенни микроорганизми.
Токсичност и токсигенност на микроорганизмите. Ендотоксини, свойства, получаване, приложение. Екзотоцини, свойства, получаване, измерване на единици. Видове екзотоксини, механизъм на действие.
Ролята на макроорганизма в развитието и курса на инфекциозни болести. Наследствени фактори. Анатомия-физиологично състояние на тялото. Ролята на условията на живот в развитието и курса на инфекциозни болести. Естествени фактори. Социални фактори.
Класификация на инфекциозни процеси в гравитацията, естеството на патогена, от източника на инфекция, метода за предаване на патогена и механизма на инфекция, в разпространението. Класификация на инфекциозни процеси върху локализацията на микробния фокус, продължителността на потока и множествеността на инфекцията.
Динамика на инфекциозния процес, неговите характеристики.
Биологичен (експериментален) метод на изследване, етапи, оценка. Лабораторни животни. Методи за инфекция.
Лабораторна работа
1 проучване на нормалната микрофлора.
А) сеитба за изучаване на нормална микрофлора на кожата на ръцете на сряда ендо и кръвта от реплика.
Принципа на метода: Стерилни парчета филтърна хартия 1x1 cm в петриево ястие, овлажнява стерилен FIZ. решение. Стерилните пинсети поставят лист хартия на повърхността на кожата на кожата за 0,5 минути. Поставете хартия на повърхността на гъста хранителна среда (отпечатък) за 1 min. Премахнете хартията. Чаши с отпечатъци се инкубират при 37 ° S, 24-48 часа.
В) Като се вземе предвид сеитбайната микрофлора, подгответе препарати от различни видове колонии, боя в грам, микроскопия (в демонстрации).
Отчитане на сеитба микрофлора:
Микроскопия на препарати:
|
Лекарство ______________ _______________________ Цвят _______________ _______________________ |
Лекарство ______________ _______________________ Цвят _______________ _______________________ |
2 Оценка на адхезивносттаД.. coli. Чрез способността им да адсорбция на повърхността на червените кръвни клетки
Принципа на метода: Еритроцитната суспензия добавя тестова култура на микроорганизми. След инкубацията се приготвят, оцветени и под микроскопа определят средния брой бактерии, които се адсорбират върху един еритроцит.
Еритроцитите в този случай се използват като клетъчен модел на чувствителен микроорганизъм.
3 Определяне на инвазивността ензими в Staphylococci
1. Plasmoagulaza.
Принципът на метода: в епруветка, съдържаща завеса плазма на заешката кръв, се прави тестова култура. След инкубация в термостата, резултатът се взема предвид. С положителен резултат от плазмата, коагулатите (коагулати).
2. Фибринолизин
Принципът на метода: тестовата култура се прави в епруветка с фибрин (измити от еритроцити от кръвен съсирек). След инкубация в термостата, резултатът се взема предвид. С положителен резултат, съединителят се разтваря.
3. Халуронидаза
Принципът на метода: в тестовата епруветка се въвежда тестова култура с хиалуронова киселина (GUK). След инкубация в термостата се добавя реагент, причиняващ коагулацията на ГУК и се взема предвид резултатът. С положителен резултат (поради разделянето на ГУК), съсирекът не се образува.
4. Leciteletelase (лецитиназа)
Принципът на метода: изолираните културни култури на Staphylococcus, попадащи върху йолотон-сол агар, който съдържа 7,5% натриев хлорид и жълтата суспензия. При положителен резултат около колониите на вирулентните стафилококи се образува дъждовен хало, дължащ се на лецитинното разцепване, съдържащо се в пилешко яйцето.
Заключение: (Избройте ензимите на вирулентност на всеки от двете изследвани щамове) _________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________
Бактериални токсини
Токсичност __________________________________________________________________________________________________________________________________________
Токциониране _________________________________________________________________
Ендотоксин ___________________________________________________
Ендотоксичен шок _______________________________________________________________________
Практическо приложение на ендотоксини:
Ecotoxin ___________________________________________________
Anatoksin ____________________________________________________________________________
Схемата за производство на екзотоксин и анатоксин.
1.____________________________________________________________________________________________
2.____________________________________________________________________________________________
4.____________________________________________________________________________________________
Практическо приложение на анатоксини:
1.____________________________________________________________________________________________
2.____________________________________________________________________________________________
3.____________________________________________________________________________________________
Лекцията изследва основните методи за определяне на чувствителността инвитро. Микроорганизми към антимикробни препарати (дифузия, е-тестове, методи за разреждане). Отразяват се подходите към емпиричното и етиотропно назначаване на антибиотици в клиничната практика. Беше обсъдени въпросите, свързани с тълкуването на резултатите от определянето на чувствителността от клинични и микробиологични гледни точки.
Понастоящем в клиничната практика има два принципа за назначаване на антибактериални лекарства: емпирични и етиотропични. Емпирично назначаване на антибиотици Въз основа на познаването на естествената чувствителност на бактериите, епидемиологични данни за съпротивлението на микроорганизмите в региона или болницата, както и резултатите от контролираните клинични проучвания. Безспорното предимство на емпиричната цел на химиотерапията е възможността за бърз старт на терапията. Освен това, с този подход, разходите за извършване на допълнителни проучвания са изключени.
Въпреки това, с неефективността на провежданата антибактериална терапия, с нозокомиални инфекции, когато е трудно да се приеме патогенът и нейната чувствителност към антибиотиците да се стремят да провеждат етиотропна терапия. Етиотропното назначаване на антибиотици Това означава не само подбора на причинителя на инфекцията от клиничния материал, но също така определя нейната чувствителност към антибиотиците. Получаването на правилни данни е възможно само с компетентното изпълнение на всички звена на бактериологични изследвания: от приемане на клинични материали, транспортиране към бактериологичната лаборатория, идентифициране на патогена, преди да определи чувствителността му към антибиотици и интерпретацията на получените резултати.
Втората причина, която причинява необходимостта от определяне на чувствителността на микроорганизмите към антибактериални лекарства, е да се получат епидемиологични данни за структурата на резистентността на патогените на небушви и нозокомиални инфекции. На практика тези данни се използват в емпиричното налагане на антибиотици, както и за образуването на болнични формули.
Методи за определяне на чувствителността към антибиотиците
Методи за определяне на чувствителността на бактериите към антибиотици са разделени на 2 групи: методи за дифузия и разреждане.
При определяне на чувствителността методът на дискотека върху повърхността на агар в петриезала е причинен от бактериална суспензия с определена плътност (обикновено еквивалентна на 0.5 mcfarland) и след това поставени дискове, съдържащи определено количество антибиотик. Дифузията на антибиотика в агар води до образуването на зоната на увеличаване на растежа на микроорганизмите около дисковете. След инкубиране на чаши в термостат при температура от 35 ° С-37 ° С в продължение на една нощ, резултатът взема предвид резултатът чрез измерване на диаметъра на зоната около диска в милиметри ().
Снимка 1. Определяне на чувствителността на микроорганизмите диско-дифузия метод.
Определянето на чувствителността на микроорганизма с помощта на е-теста се извършва подобно на тестване на метода на дифузия на диска. Разликата е, че вместо диска с антибиотик се използва е-тест лента, съдържаща градиент на антибиотични концентрации от максимум до минимален (). При пресичането на елипс зоната на потискане на растежа с лента от е-тест, стойността на минималната огромна концентрация (IPC) се получава.
Фигура 2. Определяне на чувствителността на микроорганизмите с помощта на електронни тестове.
Безспорното предимство на методите за дифузия е простотата на тестване и наличност на изпълнението във всяка бактериологична лаборатория. Въпреки това, като се вземат предвид високата цена на е-тестовете за рутинна работа, обикновено се използва метод на дискотеност.
Методи за разреждане Въз основа на използването на двойни последователни разреждания на концентрации на антибиотици от максимално до минимално (например от 128 ug / ml, 64 ug / ml и т.н. до 0.5 ug / ml, 0.25 ug / ml и 0.125 ug / ml). В този случай антибиотикът в различни концентрации допринася в течна хранителна среда (бульон) или в агар. След това бактериалната суспензия с определена плътност, съответстваща на мътността от 0,5 от McFarland, се поставя в антибиотичен бульон или на повърхността на агара в чашата. След инкубацията за една нощ при температура от 35 ° С-37, резултатите от резултатите се вземат под внимание. Наличието на растеж на микроорганизма в бульон (булнята) или на повърхността на агара предполага, че тази концентрация на антибиотик е недостатъчна, за да се потисне своята жизнеспособност. Тъй като концентрацията на антибиотиката се увеличава, растежът на микроорганизма се влошава. Първата най-малка концентрация на антибиотика (от серия от последователни разреждания), където визуално не определя бактериален растеж, се счита за минимална преобладаваща концентрация (IPC). MPC се измерва в mg / l или μg / ml ().
Фигура 3. Определяне на стойността на метода на IPC на развъждане в течна хранителна среда.
Тълкуване на резултатите от определянето на чувствителността
Въз основа на получените количествени данни (диаметърът на зоната на растежа на антибиотичен растеж или MPC стойност), микроорганизмите са разделени на чувствителни, умерено устойчиви и устойчиви (). Да се \u200b\u200bразграничат тези три категории чувствителност (или съпротива), така наречените гранични концентрации (Прекъсване) антибиотични (или гранични стойности на диаметъра на увеличаването на зоната за растеж на микроорганизма).
Фигура 4. Интерпретация на резултатите от определяне на чувствителността на бактериите в съответствие със стойностите на IPC.
Граничните концентрации не са постоянни стойности. Те могат да бъдат преразгледани, в зависимост от промяната в чувствителността на населението на микроорганизмите. Развитието и преразглеждането на критериите за устен превод се ангажират с водещи експерти (химиотерапевти и микробиолози), които са включени в специални комитети. Един от тях е Националният комитет по американските клинични лабораторни стандарти (национални стандарти на комисията - НКС1). Понастоящем стандартите на NCCLS се признават в света и се използват като международни, за да оценят резултатите от определянето на чувствителността на бактериите с многоцентрови микробиологични и клинични проучвания.
Има два подхода за тълкуването на резултатите от определянето на чувствителността: микробиологични и клинични. Микробиологичната интерпретация се основава на анализа на разпределението на стойностите на концентрациите на антибиотици, преобладаваща жизнеспособността на бактериите. Клиничното тълкуване се основава на оценка на ефективността на антибактериалната терапия.
Чувствителни микроорганизми (чувствителни)
Клинично чувствителни бактерии за приписване (като се вземат предвид получените параметри инвитро.) Ако при лечението на стандартни дози от антибиотичните инфекции, причинени от тези микроорганизми, се наблюдава добър терапевтичен ефект.
При липса на надеждна клинична информация, разделението в категорията на чувствителността се основава на получените съвместни счетоводни данни инвитро.и фармакокинетика, т.е. При концентрациите на антибиотиката, постижими на мястото на инфекцията (или в кръвния серум).
Устойчиви микроорганизми (устойчиви)
Устойчивата (устойчива) принадлежи към бактерии, когато при лечението на инфекция, причинена от тези микроорганизми, няма ефект върху терапията, дори когато се използват максимални дози на антибиотик. Такива микроорганизми имат механизми за съпротивление.
Микроорганизми с междинно съпротивление (междинно съединение)
Клинично междинно съпротивление в бактериите се разбира, ако инфекцията, причинена от такива щамове, може да има различен терапевтичен резултат. Въпреки това, лечението може да бъде успешно, ако антибиотикът се използва в доза, по-голяма от стандарта, или инфекцията е локализирана на място, където антибактериалното лекарство се натрупва във високи концентрации.
От микробиологична гледна точка, бактерии с междинно съпротивление се отнася до субпопулацията в съответствие със стойностите на IPC или диаметъра на зони, между чувствителни и устойчиви микроорганизми. Понякога щамовете с междинно съпротивление и устойчиви бактерии се комбинират в една категория устойчиви микроорганизми.
Трябва да се отбележи, че клиничното тълкуване на чувствителността на бактериите към антибиотиците е условно, тъй като резултатът от терапията не винаги зависи само от активността на антибактериалното лекарство срещу патогена. Клиницистите знаят случаи, когато в съпротивлението на микроорганизмите, според проучването инвитро.Получих добър клиничен ефект. Обратно, в чувствителността на причинителя, може да се наблюдава терапия.
В някои клинични ситуации, когато са определени недостатъчни резултати от изследване на чувствителността чрез конвенционални методи, се определя минимална бактерицидна концентрация.
Минимална бактерицидна концентрация (MBC) - най-малката концентрация на антибиотика (mg / l или μg / ml), която в изследването инвитро. Той причинява смъртта на 99,9% от микроорганизмите от нивото на източника за определен период от време.
Стойността на МБК се използва с антибиотична терапия с бактериостатично действие, или при липса на ефект от антибактериална терапия в специална категория пациенти. В определени случаи, за определяне на MBC, например, бактериален ендокардит, остеомиелит или генерализирани инфекции при пациенти с имунодефицитни състояния.
В заключение бих искал да отбележа, че днес няма методи, които биха позволили с абсолютна точност, за да се предскаже клиничният ефект на антибиотиците при лечението на инфекциозни заболявания. Тези резултати от определянето на чувствителността обаче могат да служат като добра референтна точка на клиницистите, за да изберат и коригират антибактериалната терапия.
Маса 1. Критерии за тълкуване на чувствителността на бактериите
Etest® е лента от инертна пластмаса, върху която се прилага антимикробен препарат към променлива концентрация от градиент от минимален до максимум, в диапазона, еквивалентен на 15 двойни разреждания. От друга страна, лентата се прилага по скалата на съответните минимални инхибиторни концентрации (MIC). Електронните тестове позволяват да се определи минималната инхибираща концентрация на антимикробния препарат (количествен метод на дифузия).
. Успокойте чашата на микроорганизма.
. Поставете лентите Etest® (до 2 до стандартна чаша с диаметър 90 mm или до 6 на чаша с диаметър 180 mm).
. В процеса на култивиране около лентата се образува елипсана зона на инхибиране на растежа, която пресича лентата в точката, съответстваща на микрофона.
. Електронните тестове се използват повече от 20 години.
. Повече от 100 антимикробни лекарства.
. Тръба за откриване на полизеризъм.
. Определяне на чувствителността на причудките микроорганизми, стрептококи, анаеробни микроорганизми, гъби (включително мухъл), микобактерия туберкулоза и др.
. Удобна форма за освобождаване: 30 или 100 броя, в блистер или пяна касета.
| Каталог номер | |||||
| Индивидуален Опаковка |
Касета от пяна (T ° съхранение + 20 ° С / + 4 ° С) |
(T ° съхранение -20 ° С) |
|||
| Име | 30 стрипчов | 100 стрижи | 30 стрипчов | 100 стрижи | 30 стрипчов |
| Противогъбично | |||||
| E-test amphotericin | 526318 | 526310 | |||
| E-test anidulafungin | 532008 | 532000 | |||
| E-test voriconazole | 532818 | 532810 | |||
| E-test itraconazole | 412380 | 525818 | 525810 | ||
| E-test caspofung | 412269 | 532418 | 532410 | ||
| Е-тест кетоконазол | 525918 | 525910 | |||
| E-test mikafungin | 535708 | 535700 | |||
| E-test poskaconazole | 532118 | 532110 | |||
| Е-тест флуконазол | 412350 | 510818 | 510810 | ||
| Е-тестов буцитозин | 510918 | 510910 | |||
| Анти-туберкулоза | |||||
| E-test isoniazide | 527900 | ||||
| E-test incotol | 527700 | ||||
| E-тест Етионамид | 527500 | ||||
| Антибактериален | |||||
| Е-тест азитромицин | 412251 | 501618 | |||
| E-test aztreonam | 412259 | 501718 | 501710 | ||
| E-test amikacin | 412219 | 501318 | |||
| E-test amoxicillin | 412243 | 500918 | |||
| Amoxicillin e-test / clawulanic acid (2/1) | 412241 | 501018 | 501010 | ||
| E-test ampicillin | 412253 | 501518 | |||
| E-тест ампицилин / сулбактам (2/1) | 412251* | 501818 | 501810 | ||
| Е-тест бацитрацин | 528608 | 528600 | |||
| Е-тест бензилпеницилин (висока концентрация) | 412263 | 502518 | |||
| E-тест бензилпеницилин (ниска концентрация) | 412265 | 502618 | |||
| Ванкомицин е-тест | 412488 | 525518 | |||
| E-test gatifloxacin | 530218 | 530210 | |||
| Е-тест Гентамицин (висока концентрация) | 512708 | 512700 | |||
| E-тест Gentamicin (ниска концентрация) | 412368 | 512518 | |||
| E-test dapomycin | 412324 | 535018 | 535010 | ||
| E-test doxycycline | 412328*** | 509718 | 509710 | ||
| E-test doripen | 412326*** | 535918 | 535910 | ||
| E-test imipenem | 412374 | 513618 | |||
| Е-тест канамицин | 527818 | 527810 | |||
| Е-тест кларитромицин | 508718 | 508710 | |||
| E-test clindamycin | 412315 | 509518 | |||
| E-test kolistin | 412317** | 537308 | 537300 | ||
| E-тест левофлоксацин | 412393 | 527418 | |||
| Е-тест линиязолид | 412396 | 531318 | |||
| E-test meropenem | 412402 | 513818 | |||
| Електронен метронидазол | 412404 | 530018 | |||
| E-test mezillins | 513708 | 513700 | |||
| E-test minocycline | 412409*** | 516018 | 516010 | ||
| E-test moxifloxacin | 412411** | 529018 | 529010 | ||
| E-test mupirocin | 412417*** | 413496 | 516300 | ||
| E-тест Nalidix киселина | 516508 | 516500 | |||
| E-test neultikein | 517518 | 517510 | |||
| E-тест нитрофурантоин | 412426*** | 530408 | 530400 | ||
| E-test norllocencin | 412428** | 519508 | 519500 | ||
| E-test oxacillin | 412432 | 520518 | |||
| E-test offlsacin | 519618 | 519610 | |||
| Е-тест пиперилалин | 521518 | 521510 | |||
| E-тест пиперилалин / тазобактам (4mkg / ml) | 412434 | 521418 | |||
| E-тест полимиксин | 533408 | 533400 | |||
| E-test rifampicin | 412450 | 526018 | 526010 | ||
| Е-тест специномицин | 529218 | 529210 | |||
| Е-тест стрептомицин | 412454 | 526808 | 526800 | ||
| Е-тест сулфаметоксазол | 534118 | 534110 | |||
| E-test teicoplan | 412461 | 522018 | |||
| E-test tetracycline | 412471 | 522518 | |||
| E-test taigecyclin | 412475 | 533518 | |||
| Билет за билети / Clawulanic Acid | 522618 | 522610 | |||
| E-тест тобрамицин (висока концентрация) | 533108 | 533100 | |||
| E-тест тобрамицин (ниска концентрация) | 522718 | 522710 | |||
| E-test trimethopris | 523618 | 523610 | |||
| E-тест Timetoprix / сулфаметоксазол (1/16) | 412481 | 524418 | |||
| Е-тест фосфомицин | 529108 | 529100 | |||
| E-тест Fusidiyev Acid | 511518 | 511510 | |||
| E-test hinpriristin / dalfopoid | 528718 | 528710 | |||
| E-тест хлорамфеникол | 412309 | 507518 | 507510 | ||
| E-test cefaclor | 504518 | 504510 | |||
| Е-тест цефалотин | 412307 | 503518 | 503510 | ||
| E-test cefepim | 412273 | 505018 | 505010 | ||
| E-test zefisim | 412275 | 529918 | 529910 | ||
| E-test cefoxitin | 412285 | 506518 | 506510 | ||
| Е-тест цефоперазон / сулбактам (2/1) | 529318 | 529310 | |||
| E-test cefotaxim (висока концентрация) | 412279 | 505518 | |||
| E-test cefotaxim (ниска концентрация) | 412281 | 505618 | |||
| E-test cefetan | 506308 | 506300 | |||
| E-test ceppir | 506408 | 506400 | |||
| E-test cefpodoxym | 505818 | 505810 | |||
| E-test ceftazidim | 412293 | 506718 | |||
| E-test ceftaroline | 412291 | ||||
| E-test cefitesoxime | 527308 | 527300 | |||
| E-test ceftobiprol | 412297 | ||||
| Е-тест цефтриаксон (висока концентрация) | 412301 | 506618 | 506700 | ||
| Е-тест цефтриаксон (ниска концентрация) | 412303 | 507018 | 507000 | ||
| Е-тест цефуроксим | 506918 | 506910 | |||
| Е-тест ципрофлоксацин | 412311 | 508618 | |||
| E-тест еньофлоксацин | 528908 | 528900 | |||
| E-тест еритромицин | 412334 | 510518 | |||
| Eertapene e-test | 412332 | 531618 | 531610 | ||
| номер на пощенска кутия Каталог |
|||
| Индивидуален Опаковка |
Пластмасови секционни опаковки (T ° съхранение -20 ° С) |
||
| Име | 30 стрипчов | 100 стрижи | 30 стрипчов |
| Определяне на полизезма | |||
| E-тест cefotaxim / cefotaxim + clawulanic киселина (4 ug / ml) |
412336** | 532208 | 532200 |
| E-тест цефтазидим / цефтазидим + клавуланова киселина (4 ug / ml) Проектиран да се определи наличието на ензими на бета лактамите на разширения спектър (BLRs), инхибирани от клавуланова киселина, в грам-отрицателни бактерии, включително Klebsiella spp., Escherichia coli, proteus mirabilis, други представители на семейство Enterobacteriaceae, Pseudomonas Aeruginosa |
412340** | 532508 | 532500 |
| E-test cefepim / cefepim + клавуланова киселина (4 μg / ml) Проектиран да се определи наличието на ензими на бета лактамите на разширения спектър (BLRs), инхибирани от клавуланова киселина, в грам-отрицателни бактерии, включително Klebsiella spp., Escherichia coli, proteus mirabilis, други представители на семейство Enterobacteriaceae, Pseudomonas Aeruginosa |
412338** | 534708 | 534700 |
| Електронният тест на имипенем / имипенем + EDTA е предназначен да определи наличието на метални бета лактамазни ензими в грам-отрицателни бактерии, включително pseudomonas spp., Acinetobacter spp. | 534208 | 534200 | |
| E-test vancomycin / takecoplan Проектиран да определи стабилността (или умерената стабилност) към гликопептиди на грам-положителни бактерии, включително Staphylococcus aureus, Enterococcus spp. |
537208 | 537200 | |
| E-test cefothetan / cefotan + claxacillin Проектиран да определи наличието на ензими на AMPC-бета-лактамаза в грам-отрицателни бактерии |
537108 | 537100 | |
В тази част ще разгледаме (E2E) тестването: тествайте цялото заявление изцяло, ние ще го направим от гледна точка на потребителя, всъщност автоматизирането на всички свои действия.
В нашия случай, приложението се състои само от централата - Beckend е просто не, затова тестването на E2E ще може да отвори приложение в реален браузър, като извършва набор от изчислителни и проверки стойности на валидност на екрана.
Трябва ли да проверя всички пермутации, как направихме в тестовете за единица? Не, защото вече е проверено! В тестовете на E2E проверяваме работата на не-индивидуални единици, но цялата система незабавно.
Колко струва E2E тестовете?
Първата причина, поради която трябва да има много такива тестове, - добре писмената интеграция и единични тестове трябва да бъдат достатъчни. E2E тестовете трябва да проверят дали всички елементи са правилно свързани.
Втората причина е те бавно. Ако има стотици, като единични тестове и интеграция, тогава тестването ще мине високо дълго.
Третата причина е непредсказуемото поведение на тестовете e2e. За такъв феномен е пост в блога на Google, посветен на тестването. В единичните тестове няма такова нестабилно поведение. Те могат да преминат, след това да падат - и без видими промени, изключително поради I / O. Възможно ли е да се премахне непредсказуемостта? Не, но можете да го минимизирате.
За да се отървете от непредсказуемостта, направете възможно най-малко E2E тестове. Напишете един E2E тест за десет други и само когато са наистина необходими.
Пишем E2E тестове
Нека се обърнем към писането на тестове за Е2Е. Нуждаем се от две неща: браузър и сървър за нашия Frontend код.
Първо погледнете настройката на уеб сървъра.
Конфигуриране на уеб сървър в Мока
Уеб сървър на възел? Експрес незабавно идва на ум, нека да видим кода:
Нека сървърът преди ((направено) \u003d\u003e (const app \u003d express () app.use ("/", express.static (path.reesolve (__ dirname, "../../dist"))) Server \u003d App , Слушайте (8080, направено)))) след ((() \u003d\u003e (server.close ()))
В функцията преди, създаваме експресно приложение, посочете папката DIST и се регистрирайте, слушайте порта 8080. В функцията за следновете, ние "убиваме" сървъра.
Папката Distr е мястото, където съхранявате нашите JS скриптове и където копирате HTML и CSS файлове. Можете да видите какво го правим в скрипта на NPM монтаж в Package.json:
("Име": "Frondend-testing", "Скриптове": ("Build": "WebPack && cp public / * dist", "тест": "Mocha" тест / ** / тест - *. JS "&& eslint Тествайте lib ", ...),
Това означава, че за тестовете e2e трябва първо да изпълните ENPM Run Build, и след това NPM тест. Да, това е неудобно. В случай на единични тестове не е необходимо да правите това, тъй като те започват под възел и не изискват излъчване и монтаж.
За пълнота, нека да разгледаме WebPack.config.js, където е описано как уебпакът трябва да направи файловия модул:
Module.exports \u003d (вписване: "./lib/app.js", изход: (име на файл: "bundle.js", път: path.Resolve (__ dirname, "dist")), ...)
Папката Dist се използва както в потребителската среда, така и в тестовете за E2E. Важно е - да изпълнявате E2E тестовете са необходими в средата, колкото е възможно по-голяма от "борба".
Конфигуриране на браузър в Мока
Нашето приложение е инсталирано на сървъра - остава само за да стартира браузър за него. Каква библиотека ще използваме, за да автоматизираме? Обикновено използвам популярна селен-webdriver.
За да започнем, да видим как го използваме, преди да започнем да се занимаваме с настройките:
Const (appartriver, cleanupdriver) \u003d изискват ("../ utils / browser-automation") // ... опишете ("приложение за калкулатор", функция () (нека драйвер ... преди (async () \u003d\u003e (драйвер) \u003d Изчакайте appariver ())) след (() \u003d\u003e cleanupdiver (драйвер)) той ("трябва да работи", async функция (изчакваме драйвер.get ("http: // localhost: 8080") // ... )))))
В преди функцията, ние подготвяме водача и в Atter, ние го почистваме. Подготовката на водача ще стартира браузър и почистването е да го затвори. Обърнете внимание, че настройката на драйвера е асинхронно и ние можем да използваме async / очакват, за да направим кода по-красив.
В тестовата функция отваряме адреса http: // localhost: 8080, отново използвайки очакването, като се има предвид този драйвер.Get е асинхронна функция.
Как изглеждат прилича на готовност и почистване?
Const webdriver \u003d изискват ("selenium-webdriver") constromedriver \u003d изискват ("chromedriver") const \u003d изискват ("път") const chromedriverphaddition \u003d `: $ (path.dirname (chromedriver.path))` Exports.prepareddriver \u003d async () \u003d\u003e (process.on ("beforeexit", () \u003d\u003e this.Brows && this.browser.pit ()) texp.env.path + \u003d hromedriVerpatedtition връщане очаква нов webdriver.builder () .disablevirondingoverrides () \\ t .Forbrowser ("chrome") .setloggingprefs ((браузър: "all", драйвер: "all")) .build ()) Износ. ) process.env.path \u003d process.env.path.replace (chromedriverphathddition, ")
Това е трудно нещо. И трябва да призная нещо: този код е написан от кръвта (O, и работи само в UNIX системи). Тя е написана с Google, Stack Overflow и документацията на WebDriver и е силно модифицирана от научен Tyk. Но тя работи!
Теоретично, можете просто да се карате в тестовете си, без да го разбирате, но нека погледнем за секунда.
Първите две линии са свързани с WebDriver - драйвер за браузър. Принципът на работа на Webdriver на Selenium е наличен API (в модула Selenium-Webdriver, който ние внасяме в ред 1), който работи с всеки браузър, и разчита на драйверите на браузъра до ... Управление на различни браузъри. Водачът, който използвах, е хромдривър, внесен в ред 2.
Chrome драйверът не се нуждае от браузър с кола: той всъщност инсталира свой собствен изпълним файл, когато извършвате NPM инсталацията. За съжаление, по някаква причина не мога да разбера, той не може да го намери, а директорията на Chromedriver трябва да бъде добавена към пътя (това е точно това, което не работи в Windows). Това правим в ред 9. Ние също го премахваме от пътя на етапа на почистване, в ред 22.
Така че, ние конфигурираме драйвера на браузъра. Сега е време да конфигурирате (и да върнете) уеб драйвер, който правим в редове 11-15. И тъй като функцията Asynchronne изгради и се връща, ние го чакаме с очакване.
Защо го правим в редове 11-15? Причините са скрити от мъжа. Чувствайте се свободни да копирате - не са приложени гаранции, но аз използвах този код за известно време и нямаше проблеми.
Нека започнем тест
Завършихме настройката - време е да погледнем кода, който използва WebDriver, за да управлява браузъра и да тества нашия код.
Класификация, общи подходи за провеждане. Методи за дифузия: метод на хартиени дискове, е-тест.Методи за определяне на чувствителността на бактериите към антибиотици са разделени на 2 групи:
1. Методи за дифузия:
. използване на антибиотични дискове
. с помощта на електронни тестове
2. Методи за серийни разреждания:
. Разреждане в течната хранителна среда (бульон)
. Развъждане в агарска среда
Методите за определяне на чувствителността са разработени през втората половина на 60-те - началото на 70-те години на ХХ век и тъй като методологическата гледна точка не се подлага на фундаментални промени.
За всички методи са често срещани следните стъпки:
- Подготовка и инспекция на качеството на хранителните вещества
- Приготвяне на суспензия на изследваните микроорганизми (инокулум)
- Инокулация
- за дифузионални методи - етап на прилагане на дискове или е-тест ленти върху гъста хранителна среда.
- инкубация
- счетоводство и тълкуване на резултатите
- формулировка на препоръките за лечение
Методите за дифузия са базирани на дифузията на антибактериалното лекарство (ABP) от носителя към гъста хранителна среда, инокулиран микроорганизъм и регистриране на диаметъра на инхибирането на инхибиторната зона (забавяне) на растежа на изследвания микроорганизъм.
. Методът е по-малко чувствителен и по-малко точен от метода на серийното разреждане, но на практика се използва по-често поради простотата си. Публикувано на Ref.RF.
. Скоростта на дифузия в агар от всякакви лекарства зависи от неговата структура, молекулно тегло, наличието на примеси, състав и рН на средата.
Метода на хартиени дискове с антибиотик (метод за задушаване).
. За този метод се използват стандартни дискове, съдържащи определено количество антибиотици и стандартна хранителна среда, необходима за растат този тип микроорганизъм. По време на определени граници, величината на диаметъра на зоната на растеж е обратно пропорционална на IPC. . Към повърхността на агара се прилага бактериална суспензия с определена плътност. . Поставете дисковете, съдържащи определено количество антибиотик. . Инкубирайте с плъзгащи се благоприятни за всеки специфичен микроорганизъм. . Измерете диаметрите на зоните за забавяне на растежа около диска в милиметри (като се вземат предвид диаметъра на диска). . Оценете резултата според специална таблица чрез сравняване на диаметъра на зоните за забавяне на растежа с диаметър на границата в таблицата. . Изследваната култура се отнася до една от трите категории: чувствителни, умерено чувствителни и стабилни 
Е-тест (е-тест или епизирометричен метод)
Методът е близък според технологията на хартиените дискове.
. Тесната полимерна лента (0.5x6.0 cm) се използва като носител (0.5х6.0 cm), който причинява градиент на концентрациите на ABP (от минимум до максимум). Стойностите на концентрацията на ABP във всяка част от лентата се прилагат върху външния (адресиран до изследователя) на повърхността.
. Инхибирането на растежа на микроорганизма около лентите на носителя се осъществява в зоната, където концентрацията на антибиотиката, която се разпространява от носителя, е по-висока от IPC.
. При пресечната точка на елипсовата зона на потискане на растежа с лента от ЕД се получава MPK.
Е-тестът съчетава простотата на метода на хартиените дискове и точността на масовия метод за размножаване 
Методи, използвани за сравнителна оценка in vitro лекарства на антимикробна терапия: методът на серийните разреждания в течни и гъсти хранителни носители.
Методи за серийни разреждания:
. Позволява ви да определите количествено чувствителността на специалния микроорганизъм към антибактериални агенти и да определите IPC на лекарството.
. Използва се за сравнителна оценка на антимикробната активност in vitro разработена подготовка и оригинално средство.
. За да се определи величината на IPC, предварително определените концентрации на антибиотици са направени в хранителната среда, която след това се посява културата на изследвания микроорганизъм. След инкубацията се оценява присъствието или липсата на видим растеж.
. Въз основа на използването на двойни последователни разреждания на концентрациите на ABP от максимален до минимален (например от 128 ug / ml, 64 ug / ml и т.н. до 0.5 ug / ml, 0.25 ug / ml и 0.125 μg / ml).
. В течни и агар хранителни медии. Метод на серийно разреждане в течна хранителна среда (бульон)
Има 2 варианта за този метод:
MACROMETEDE (TEST епруветка) и микрометър (таблетка).
Макролец.
. Тестването се извършва в епруветки в крайна обем от 1 ml за всяко разреждане.
. Хранителният бульон се бутилира при 0.5 ml във всяка тестова тръба. Броят на тръбите определят необходимия обхват от червено размножаване.
. Подготовка на суспензията на изследваните микроорганизми:
- от стандартната суспензия на всеки микроорганизъм (~ 10 8, CFU / ml) се приготвя работна суспензия (~ 10 6 CFU / ml). Приготвяне на двойни серийни разреждания ABP: - Приготвя се основният разтвор на ABP на изследвания препарат и сравнителен препарат (оригинал) при концентрация от 1000 μg / ml и по-висока (като се вземе предвид съдържанието на съдържанието на активното вещество). - основните решения на ABP на изследваното генерично и сравняване на наркотици (оригинал) приготвят работни решения на ABP, използвайки течната хранителна среда. (Концентрацията на работни разтвори се изчислява въз основа на необходимата максимална концентрация в редица серийни разреждания, като се вземат предвид коефициента на разреждане при последващо инокулиране на суспензията на микроорганизма), серийните разреждания се получават: 0.5 ml работещ разтвор на ABP се довежда до първата тръба, съдържаща 0,5 ml бульон. Разбъркайте. Нова пипета (накрайник) се прехвърля в 0,5 ml разтвор на ABP в бульон до втората изпитвателна епруветка, съдържаща 0.5 ml бульон и т.н., докато се приготви цялата необходима серия от развъждане. От последната тестова тръба се отстранява 0,5 ml. По този начин, ред тръби с ABP разтвори, концентрации, в които се различават в съседни епруветки с 2 пъти. Инокулация: 0,5 ml микробна суспензия с концентрация на микроорганизъм от ~ 10 6 се добавя към всяка епруветка с 0.5 ml от съответното размножаване на ABP. Крайната концентрация на микроорганизъм във всяка епруветка ~ 5x10 5 CFU / ml. . Контролна епруветка с бульон и култура на микроорганизъм (контрол на растежа). Отрицателна тръба за контрол - клубена (контрол на стерилността). . Инкубация: Всички епруветки, затворени с щепсели или капачки, се инкубират при условия, които гарантират растежа на тестовете на микроорганизмите. . Счетоводство и интерпретация на резултатите: Изпитваните тръби с култури се разглеждат в предаваната светлина. Растежът на културата в тръба с ABP се сравнява с контролната тръба. - Наличието на растеж на микроорганизъм в бульон (мътност на бульон) показва, че тази концентрация на антибиотици е недостатъчна, за да се потисне своята жизнеспособност. - Както се увеличава концентрацията на антибиотиката, растежът на микроорганизма се влошава. Първата най-малка концентрация на антибиотика (от серия от последователни разреждания), където бактериалният растеж се определя визуално, се счита, че е минимална преобладаваща концентрация (IPC). Лекарства на антибактериална терапия - сравнете резултатите, получени за първоначалното лекарство и изследваните генерични LS. Те заключават за тяхната еквивалентност срещу спектъра (списъкът на използваните микроганизми) и степента на антимикробна активност (стойности на IPC). 
. Дефиниция на МБК: От малкото последни тестови тръби с забавяне на височината, направете сектор за контура върху секторите на петри. За MBK, което, по правило, за няколко разреждания е по-малка от IPC, концентрацията на лекарството в последната тестова тръба, от която се отглежда растеж. . Липса на метод: Ниска производителност - приложение е ограничена до проучвания на малък брой микроорганизми.
Микромет
, Процедурата за тестване е подобна на тази при използване на макрометър
Представянето на крайния обем е до 0.2 ml. Съответното оборудване на лабораторията: таблетка за 96 дупки със стерилни корици, многоканални пипети. Работните решения на ABP могат да бъдат направени в таблетката на кладенците предварително, след което те се съхраняват в полиетилен при температури под 60 ° С. Моментът на употреба. . Предимствата на метода: - висока производителност - възможността за дългосрочно съхранение на предварително подготвени консумативи за пестене на таблетки. Публикувано на Ref.RF.
Метод на серийни разреждания в агарната среда. Принципът на тестване е подобен на метода на размножаване в бульон. Получаване на суспензия на изследваните микроорганизми: - стандартната суспензия на всеки изучен микроорганизъм трябва да съдържа ~ 10 8 CFU / ml. - Стандартната микробна суспензия за експеримента се развежда с ~ 10 пъти, за да се получи концентрация на микроорганизъм от ~ 10 7 CFU / ml. Подготовка на двустранни серийни разреждания ABP за първоначалното лекарство и изследваното лекарство генерично се извършва по подобен начин на метода на размножаване в бульон. Агасната среда се разтопява и охлажда до температура 45-50 ° С. . Получаване на чаши с агаризирана среда и разреждане на ABP: Смесете агарната среда и разтворите на ABP директно в петричните ястия (за пластмасови чаши с диаметър 90 mm до 2 ml от разтвора на ABP, добавете 18 ml разтопен разтвор и охладен агар). . Инокулация и инкубация: Бактериологични контури прехвърлят 1-2 ul суспензия на изследваните микроорганизми на повърхността на агарната среда. По този начин крайната сеярна доза е ~ 10 4 ядро \u200b\u200b(стандартен бактериологичен контур с диаметър 3 mm толерира 1-2 ul течност). . На повърхността на агара се образува петна с диаметър 5-8 mm. След изсушаване на чашките, чашите се превръщат и инкубират при условия, благоприятни за растежа на изследваните микроорганизми. . Счетоводство и тълкуване на резултатите: подобно на метода на размножаване в бульон. Петричните ястия се поставят на тъмно, а не отразяваща светлина. За IPC приема концентрацията на АББ, което предизвика пълно инхибиране на видимия растеж. . Контрол: инокулирано суспензия на култури от микроорганизми на чаши с агар без ABP (контрол на растежа). Отрицателен контрол: чаши с агар (контрол на стерилността). Предимствата на метода: на една чаша можете да определите чувствителността на няколко микроорганизми.
Обемът на проучванията върху сравнителна оценка на in vitro антимикробната активност за генерични и оригинални инструменти за антимикробна терапия.
Обемът на проучванията върху сравнителна оценка in vitro антимикробна активност на генерични антимикробни лекарства:
Изследователски изследвания: Потвърждаване на кореспонденцията на генеричното лекарствено референция (оригинал) на спектъра (микроорганизми) и степента (MPC, MBC) на антимикробната активност.
Изпитване на тествани микроорганизми: 1-2 щам на всеки от микроорганизмите, включени в спектъра
- Референтен колекционер
-Дени клинични щамове в болници
Определят се стойностите на IPC и MBC.
, Контрол: Подготовката на сравнението е оригиналната лекарство
Полученият резултат: IPC и MBC развиват генерични антимикробни лекарства са включени в допустимите диапазони на стойности и напълно съвпадат с IPC и MBC сравняващите препарати (оригинални лекарства) за колекционерски и клинични щамове.
Процедурата за проучвания по дефиниция in vitro антимикробна активност на нови антимикробни съединения: \\ t
Първа оценка на чувствителността към нови съединения от референтни щамове на различни видове грам-отрицателни и грам-положителни микроорганизми (4-5 щама за всеки тип);
, Подробно изследване на степента на антибактериална активност на съединенията срещу щамовете на грам-отрицателни и грам-положителни микроорганизми от международни колекции с добре познати механизми за резистентност (метод на серийно разреждане);
, Изследване на дейност срещу клинични щамове на условно патогенни и патогенни микроорганизми в сравнение с известни лекарства близо до химическата група или подобно на антимикробно действие:
- в случай на преференциална дейност срещу контрол на грам-положителни микроорганизми - естествени пеницилини, цефалоспорини I - II поколения, макролиди, линкьоосамид; - в дейност по отношение на грам-отрицателен контрол на микроорганизмите - полимиксин В, азитреон; -Заготовка на широк спектър от контрол на действията - полусинтетични пеницилини, аминогликозиди, тетрациклини, цефалоспорини III - IV поколения
. Оценка на антимикробната активност срещу проблемни патогени: метицилин-резистентни стафилококи Stamptococcus пневмония, множество резистентни ентеробактерии, устойчиви на псевдомонас геномогликозиди и др.
, Първите терапевтични концентрации на нови лекарства се установяват, като се вземат предвид токсичността, определена в експериментите върху изследването на острата токсичност;
. Сравнятелната степен на антибактериална активност на лекарства се оценява от количеството на IPC или MBC, определено от не по-малко от 2 стойности на дозата на семената: минимален - 10 4 - 10 5 CFU / ml и максимум - 10 6 - 10 9 CFU / ml в зависимост от вида на патогена; Към днешна дата няма методи, които биха позволили с абсолютна точност за предсказване на клиничния ефект на антибиотиците при лечението на инфекциозни заболявания. Тези резултати от определянето на чувствителността обаче могат да служат като добра референтна точка на клиницистите, за да изберат и коригират антибактериалната терапия.
Съдържание Отваряне
1. Фармацевтична микробиология. Темата и задачите на фармацевтичната микробиология.
2. Аптека и фармацевтични продукти: историята на възникването и развитието.
3. Лекарство: определение, класификация.
4. Композиция на лекарството | Фармацевтично вещество, ексципиент.
5. оригинални и генерични лекарства. Име на лекарствата.
10. Действието на вредните фактори за микроорганизмите. Ефекта на температурния фактор и използването му във фармацевтични продукти.
11. Ефект на радиация върху микроорганизми, типове радиационни.
12. Въздействие върху микроорганизмите на химически увреждащи фактори
13. Стерилизация. Ниво на гаранция за стерилизация (SAL). Критерии за избор на метода на стерилизация.
14. Термична и химическа стерилизация
15. Контрол на ефективността на стерилизиращите устройства.
16. Индустриална дезинфекция
17. Дезинфектанти и антисептици. Изисквания за химически дезинфектанти и антисептици.
18. Консерванти и тяхното използване във фармацевтично производство
